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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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豬(zhū)乙(yǐ)型腦炎病毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015357 |
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期，則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能下降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
豬乙型(xíng)腦炎(yán)病毒PCR檢測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的溫度下進(jìn)行，結合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因區，其特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是以指數方式(shì)增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反應(yīng)液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用同位(wèi)素，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製品及總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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