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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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戊糖片(piàn)球菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Pediococcus pentosaceusPCR |
YS-P014568 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的(dí)試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要求需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性與保守性(xìng)。
戊糖片球菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的正確結合是(shì)關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結合的特(tè)異性大大增加(jiā)，被擴增的靶基因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正確度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加好後，即在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
