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核酸檢測試劑(jì)盒
| 產品名稱 | 規格(gé) | 貨號 |
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肉(ròu)毒杆(gān)菌A/B型(CB-A/B)核酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015647 |
儲(chǔ)存條件:-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún),避免反復凍融。
運輸(shū):低溫,避光。
有(yǒu)效期(qī):一年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián),這是指在適當(dāng)的儲存溫度下(xià)。核酸(suān)擴增部(bù)分的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在一次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú),否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
2.可疑:有明(míng)顯的指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為可疑(yí)樣本;對於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次,若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期,則判定為(wéi)陽性,否(fǒu)則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染,試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn),樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果;
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降,可能會導致(zhì)出現假陰性結果。

②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng);
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
肉(ròu)毒杆菌(jūn)A/B型(CB-A/B)核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的正確(què)結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結合及引物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行,結(jié)合的特異性大(dà)大(dà)增加(jiā),被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持很高的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區(qū),其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí),能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒(dú)的檢測(cè)中,PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位);在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶,一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一(yī)般在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析,不一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素(sù),無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染,易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞,DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗嗽(sòu)液(yè),毛發,細胞(bāo),活PCR技術概論(lùn)。
