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核(hé)酸檢測(cè)試劑盒
轉(zhuǎn)基因(yīn)水(shuǐ)稻LLRICE核(hé)酸(suān)檢測試(shì)劑盒
| 產品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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轉基因(yīn)水稻LLRICE核酸檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015598 |
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū):低溫,避光(guāng)。
有效期:一(yī)年(nián)
貨期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年,這(zhè)是指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià),產物檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。

u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好超過正常陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng),有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小於等於35;
3. 以上要求需(xū)在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視為無效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本;對(duì)於可疑樣本建(jiàn)議復核一(yī)次,若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,則(zé)判定(dìng)為陽性,否則判定為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數擴增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染(rǎn),試(shì)劑汙染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果;
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存不(bù)當或試劑配製(zhì)不準確(què)引起的(dí)試劑檢測(cè)效能下降,可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假陰性結(jié)果。

②鹼基配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
轉基因(yīn)水稻(dào)LLRICE核(hé)酸檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng),使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高的溫度下進行(háng),結合的特異性大(dà)大增(zēng)加,被擴增的靶基因片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保守性(xìng)高的(dí)靶基因區(qū),其(qí)特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個靶(bǎ)細胞(bāo);在(zài)病毒的檢測中(zhōng),PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位);在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一次性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後,即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一(yī)般用電泳分(fēn)析,不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素(sù),無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn),易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養細胞,DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液,體腔液,洗嗽液(yè),毛發,細胞,活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
