技術文獻
相(xiāng)關(guān)資訊(xùn)
技(jì)術文獻
人體(tǐ)甲(jiǎ)狀腺癌組(zǔ)織源(yuán)組(zǔ)織(zhī)提(tí)取物培養實(shí)驗事(shì)項
人體甲狀腺癌(ái)組織源組織(zhī)提(tí)取物培(péi)養實驗(yàn)事項;
1. 試劑準備:所(suǒ)有試劑都(dū)必須(xū)在使用前(qián)達(dá)到(dào)室(shì)溫(wēn),使(shǐ)用後(hòu)請(qǐng)立即按(àn)照(zhào)說明書(shū)要求(qiú)保存(cún)試劑。 實驗操作(zuò)中請使用一次性的(dí)吸頭,避(bì)免(miǎn)交叉汙(wū)染。
2. 加樣(yàng):加樣(yàng)或(huò)加試(shì)劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標本 / 標準(zhǔn)品,酶(méi)結合物或底(dǐ)物時(shí),前一(yī)個(gè)孔(kǒng)與後一個孔(kǒng)加(jiā)樣之間的時間(jiān)間隔(gé)如(rú)果太大(dà),將會(huì)導致不(bù)同(tóng)的(dí)“預孵育"時(shí)間,從而明顯地影(yǐng)響(xiǎng)到測(cè)量值的(dí)準(zhǔn)確(què)性及(jí)重(zhòng)復性(xìng)。一次(cì)加(jiā)樣時(shí)間(包括標(biāo)準品及所(suǒ)有(yǒu)樣品(pǐn))好控製在10分鐘(zhōng)內,如(rú)標(biāo)本數量(liáng)多,推薦使用多道移液(yè)器加(jiā)樣。
3. 孵育(yù):為防止(zhǐ)樣(yàng)品(pǐn)蒸發,試驗時將反應板(bǎn)放於(yú)鋪有(yǒu)濕(shī)布的(dí)密閉(bì)盒內,酶標(biāo)板(bǎn)加上蓋或覆膜,以避免(miǎn)液體(tǐ)蒸發;洗(xǐ)板後應(yīng)盡快進行下(xià)步操作(zuò),任何(hé)時侯(hóu)都應(yīng)避免(miǎn)酶標(biāo)板處(chǔ)於(yú)幹(gān)燥狀態;同(tóng)時(shí)應(yīng)嚴格遵守(shǒu)給(gěi)定(dìng)的孵(fū)育時(shí)間(jiān)和(hé)溫(wēn)度(dù)。
4. 洗(xǐ)滌(dí):洗滌過(guò)程中反(fǎn)應孔中殘留(liú)的洗(xǐ)滌液(yè)應在(zài)濾紙上充分(fēn)拍(pāi)幹,勿將(jiāng)濾(lǜ)紙直(zhí)接放(fàng)入反(fǎn)應孔(kǒng)中(zhōng)吸水(shuǐ),同(tóng)時要消除板底(dǐ)殘(cán)留(liú)的液(yè)體(tǐ)和手(shǒu)指(zhǐ)印(yìn),避(bì)免影響後(hòu)的酶標儀讀(dú)數。
5. 試劑配(pèi)製(zhì):Detection A及Detection B在使用前請手甩(shuǎi)幾下或(huò)少(shǎo)時(shí)離(lí)心處理,以使管壁或瓶蓋(gài)的液體(tǐ)沉積到管底。標準品(pǐn),檢(jiǎn)測(cè)溶(róng)液(yè)A工(gōng)作液,檢(jiǎn)測溶液B工作(zuò)液(yè)請依據(jù)所需的量配(pèi)置(zhì)使用,並使(shǐ)用相應的(dí)稀釋液配(pèi)製(zhì),不(bù)能(néng)混淆(xiáo)。請(qǐng)確(què)配置標(biāo)準品(pǐn)及(jí)工(gōng)作(zuò)液,盡(jìn)量(liáng)不要(yào)微量配置(zhì)(如(rú)吸取(qǔ)檢(jiǎn)測(cè)溶液A時,一次(cì)不(bù)要小(xiǎo)於(yú)10μl),以(yǐ)避免由(yóu)於不準確稀釋(shì)而造(zào)成的濃(nóng)度誤(wù)差(chà);請勿重(zhòng)復(fù)使用已稀(xī)釋(shì)過(guò)的標準品,檢(jiǎn)測溶(róng)液A工作(zuò)液或檢(jiǎn)測溶液(yè)B工作(zuò)液(yè)。
6. 反應(yīng)時(shí)間的控製(zhì):加入(rù)底物(wù)後請定時觀(guān)察反(fǎn)應孔(kǒng)的顏色變(biàn)化(比(bǐ)如,每隔(gé)10分鐘),如顏(yán)色較(jiào)深,請提前加入終止(zhǐ)液(yè)終止反應(yīng),避(bì)免(miǎn)反(fǎn)應(yīng)過(guò)強從(cóng)而影(yǐng)響酶(méi)標(biāo)儀光密(mì)度讀數(shù)。
7. 底物:底物請(qǐng)避(bì)光保存(cún),在儲(chǔ)存(cún)和溫育時(shí)避(bì)免強光直接照射。
建議(yì)檢測(cè)樣品時均(jūn)設雙孔(kǒng)測定,以(yǐ)保證(zhèng)檢(jiǎn)測(cè)結果的(dí)準(zhǔn)確(què)性(xìng)。
1. 試劑準備:所(suǒ)有試劑都(dū)必須(xū)在使用前(qián)達(dá)到(dào)室(shì)溫(wēn),使(shǐ)用後(hòu)請(qǐng)立即按(àn)照(zhào)說明書(shū)要求(qiú)保存(cún)試劑。 實驗操作(zuò)中請使用一次性的(dí)吸頭,避(bì)免(miǎn)交叉汙(wū)染。
2. 加樣(yàng):加樣(yàng)或(huò)加試(shì)劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標本 / 標準(zhǔn)品,酶(méi)結合物或底(dǐ)物時(shí),前一(yī)個(gè)孔(kǒng)與後一個孔(kǒng)加(jiā)樣之間的時間(jiān)間隔(gé)如(rú)果太大(dà),將會(huì)導致不(bù)同(tóng)的(dí)“預孵育"時(shí)間,從而明顯地影(yǐng)響(xiǎng)到測(cè)量值的(dí)準(zhǔn)確(què)性及(jí)重(zhòng)復性(xìng)。一次(cì)加(jiā)樣時(shí)間(包括標(biāo)準品及所(suǒ)有(yǒu)樣品(pǐn))好控製在10分鐘(zhōng)內,如(rú)標(biāo)本數量(liáng)多,推薦使用多道移液(yè)器加(jiā)樣。
3. 孵育(yù):為防止(zhǐ)樣(yàng)品(pǐn)蒸發,試驗時將反應板(bǎn)放於(yú)鋪有(yǒu)濕(shī)布的(dí)密閉(bì)盒內,酶標(biāo)板(bǎn)加上蓋或覆膜,以避免(miǎn)液體(tǐ)蒸發;洗(xǐ)板後應(yīng)盡快進行下(xià)步操作(zuò),任何(hé)時侯(hóu)都應(yīng)避免(miǎn)酶標(biāo)板處(chǔ)於(yú)幹(gān)燥狀態;同(tóng)時(shí)應(yīng)嚴格遵守(shǒu)給(gěi)定(dìng)的孵(fū)育時(shí)間(jiān)和(hé)溫(wēn)度(dù)。
4. 洗(xǐ)滌(dí):洗滌過(guò)程中反(fǎn)應孔中殘留(liú)的洗(xǐ)滌液(yè)應在(zài)濾紙上充分(fēn)拍(pāi)幹,勿將(jiāng)濾(lǜ)紙直(zhí)接放(fàng)入反(fǎn)應孔(kǒng)中(zhōng)吸水(shuǐ),同(tóng)時要消除板底(dǐ)殘(cán)留(liú)的液(yè)體(tǐ)和手(shǒu)指(zhǐ)印(yìn),避(bì)免影響後(hòu)的酶標儀讀(dú)數。
5. 試劑配(pèi)製(zhì):Detection A及Detection B在使用前請手甩(shuǎi)幾下或(huò)少(shǎo)時(shí)離(lí)心處理,以使管壁或瓶蓋(gài)的液體(tǐ)沉積到管底。標準品(pǐn),檢(jiǎn)測(cè)溶(róng)液(yè)A工(gōng)作液,檢(jiǎn)測溶液B工作(zuò)液(yè)請依據(jù)所需的量配(pèi)置(zhì)使用,並使(shǐ)用相應的(dí)稀釋液配(pèi)製(zhì),不(bù)能(néng)混淆(xiáo)。請(qǐng)確(què)配置標(biāo)準品(pǐn)及(jí)工(gōng)作(zuò)液,盡(jìn)量(liáng)不要(yào)微量配置(zhì)(如(rú)吸取(qǔ)檢(jiǎn)測(cè)溶液A時,一次(cì)不(bù)要小(xiǎo)於(yú)10μl),以(yǐ)避免由(yóu)於不準確稀釋(shì)而造(zào)成的濃(nóng)度誤(wù)差(chà);請勿重(zhòng)復(fù)使用已稀(xī)釋(shì)過(guò)的標準品,檢(jiǎn)測溶(róng)液A工作(zuò)液或檢(jiǎn)測溶液(yè)B工作(zuò)液(yè)。
6. 反應(yīng)時(shí)間的控製(zhì):加入(rù)底物(wù)後請定時觀(guān)察反(fǎn)應孔(kǒng)的顏色變(biàn)化(比(bǐ)如,每隔(gé)10分鐘),如顏(yán)色較(jiào)深,請提前加入終止(zhǐ)液(yè)終止反應(yīng),避(bì)免(miǎn)反(fǎn)應(yīng)過(guò)強從(cóng)而影(yǐng)響酶(méi)標(biāo)儀光密(mì)度讀數(shù)。
7. 底物:底物請(qǐng)避(bì)光保存(cún),在儲(chǔ)存(cún)和溫育時(shí)避(bì)免強光直接照射。
建議(yì)檢測(cè)樣品時均(jūn)設雙孔(kǒng)測定,以(yǐ)保證(zhèng)檢(jiǎn)測(cè)結果的(dí)準(zhǔn)確(què)性(xìng)。
- 上一條(tiáo):人Smad7 ELISA免費代(dài)測(cè)試劑盒樣本處理及要求(qiú)
- 下一(yī)條(tiáo):肝素elisa試劑(jì)盒操(cāo)作(zuò)步驟
