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人(rén)Smad7 ELISA免費(fèi)代測試劑(jì)盒樣(yàng)本處理(lǐ)及要求:
1. 血(xiě)清(qīng):室溫血液自然(rán)凝固(gù)10-20分(fēn)鐘,離心20分鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉/分(fēn))。仔細收(shōu)集(jí)上(shàng)清,保存(cún)過程中(zhōng)如出現沉(chén)澱(diàn),應再(zài)次離心(xīn)。
2. 血(xiě)漿:應根據標本的要(yào)求選(xuǎn)擇(zé)EDTA或檸檬酸鈉作為(wéi)抗凝(níng)劑,混合10-20分鐘後,離心20分(fēn)鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔(zī)細收集上清(qīng),保存(cún)過程(chéng)中(zhōng)如有沉澱形成,應該再(zài)次離(lí)心。
3. 尿(niào)液:用無菌管(guǎn)收集,離心20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔(zī)細收(shōu)集上(shàng)清(qīng),保存(cún)過(guò)程(chéng)中(zhōng)如(rú)有沉(chén)澱形成,應(yīng)再(zài)次(cì)離心(xīn)。胸腹水(shuǐ),腦脊液參(cān)照實行(háng)。
4. 細(xì)胞(bāo)培(péi)養上(shàng)清:檢測分泌(mì)性(xìng)的(dí)成(chéng)份(fèn)時,用無菌管收集(jí)。離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉/分(fēn))。仔細(xì)收集(jí)上(shàng)清。檢測細胞(bāo)內(nèi)的成(chéng)份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋(shì)細胞懸液,細胞濃度(dù)達到
100萬(wàn)/ml左右。通(tōng)過反復凍融,以(yǐ)使(shǐ)細胞(bāo)破(pò)壞(huài)並放(fàng)出細(xì)胞(bāo)內(nèi)成份。離心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔細收集上清(qīng)。保(bǎo)存(cún)過程中如(rú)有(yǒu)沉(chén)澱形成,應(yīng)再次(cì)離(lí)心。
5. 組(zǔ)織標(biāo)本:切割(gē)標本後,稱取(qǔ)重(zhòng)量。加入一定量的(dí)PBS,PH7.4。用液氮迅速(sù)冷(lěng)凍保存備(bèi)用。標本融化(huà)後仍然(rán)保持(chí)2-8℃的(dí)溫(wēn)度。加入一(yī)定量的(dí)PBS(PH7.4),用手(shǒu)工或(huò)匀(yún)漿(jiāng)器(qì)將標(biāo)本匀(yún)漿充分(fēn)。離(lí)心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔細收集上(shàng)清。分(fēn)裝後一份待檢測,其餘冷凍(dòng)備(bèi)用(yòng)。
6. 標(biāo)本采集(jí)後(hòu)盡早(zǎo)進行(háng)提取,提取(qǔ)按相關文獻進行(háng),提(tí)取(qǔ)後(hòu)應(yīng)盡(jìn)快進(jìn)行實(shí)驗。若(ruò)不能(néng)馬上(shàng)進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放於-20℃保存,但應(yīng)避(bì)免(miǎn)反復凍融.
7. 不(bù)能(néng)檢(jiǎn)測含NaN3的(dí)樣(yàng)品,因(yīn)NaN3抑製辣根過氧化物(wù)酶的(HRP)活(huó)性(xìng)。
1. 血(xiě)清(qīng):室溫血液自然(rán)凝固(gù)10-20分(fēn)鐘,離心20分鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉/分(fēn))。仔細收(shōu)集(jí)上(shàng)清,保存(cún)過程中(zhōng)如出現沉(chén)澱(diàn),應再(zài)次離心(xīn)。
2. 血(xiě)漿:應根據標本的要(yào)求選(xuǎn)擇(zé)EDTA或檸檬酸鈉作為(wéi)抗凝(níng)劑,混合10-20分鐘後,離心20分(fēn)鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔(zī)細收集上清(qīng),保存(cún)過程(chéng)中(zhōng)如有沉澱形成,應該再(zài)次離(lí)心。
3. 尿(niào)液:用無菌管(guǎn)收集,離心20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔(zī)細收(shōu)集上(shàng)清(qīng),保存(cún)過(guò)程(chéng)中(zhōng)如(rú)有沉(chén)澱形成,應(yīng)再(zài)次(cì)離心(xīn)。胸腹水(shuǐ),腦脊液參(cān)照實行(háng)。
4. 細(xì)胞(bāo)培(péi)養上(shàng)清:檢測分泌(mì)性(xìng)的(dí)成(chéng)份(fèn)時,用無菌管收集(jí)。離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉/分(fēn))。仔細(xì)收集(jí)上(shàng)清。檢測細胞(bāo)內(nèi)的成(chéng)份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋(shì)細胞懸液,細胞濃度(dù)達到
100萬(wàn)/ml左右。通(tōng)過反復凍融,以(yǐ)使(shǐ)細胞(bāo)破(pò)壞(huài)並放(fàng)出細(xì)胞(bāo)內(nèi)成份。離心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔細收集上清(qīng)。保(bǎo)存(cún)過程中如(rú)有(yǒu)沉(chén)澱形成,應(yīng)再次(cì)離(lí)心。
5. 組(zǔ)織標(biāo)本:切割(gē)標本後,稱取(qǔ)重(zhòng)量。加入一定量的(dí)PBS,PH7.4。用液氮迅速(sù)冷(lěng)凍保存備(bèi)用。標本融化(huà)後仍然(rán)保持(chí)2-8℃的(dí)溫(wēn)度。加入一(yī)定量的(dí)PBS(PH7.4),用手(shǒu)工或(huò)匀(yún)漿(jiāng)器(qì)將標(biāo)本匀(yún)漿充分(fēn)。離(lí)心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔細收集上(shàng)清。分(fēn)裝後一份待檢測,其餘冷凍(dòng)備(bèi)用(yòng)。
6. 標(biāo)本采集(jí)後(hòu)盡早(zǎo)進行(háng)提取,提取(qǔ)按相關文獻進行(háng),提(tí)取(qǔ)後(hòu)應(yīng)盡(jìn)快進(jìn)行實(shí)驗。若(ruò)不能(néng)馬上(shàng)進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放於-20℃保存,但應(yīng)避(bì)免(miǎn)反復凍融.
7. 不(bù)能(néng)檢(jiǎn)測含NaN3的(dí)樣(yàng)品,因(yīn)NaN3抑製辣根過氧化物(wù)酶的(HRP)活(huó)性(xìng)。
