大鼠背(bèi)根(gēn)神(shén)經(jīng)元(yuán)細胞

大(dà)鼠背(bèi)根(gēn)神經元細(xì)胞(bāo)分(fēn)離(lí)自(zì)脊椎(zhuī)背根(gēn)神(shén)經(jīng)節(jié)；感(gǎn)覺神(shén)經(jīng)母細胞發(fā)出(chū)軸突，呈(chéng)束(shù)狀，左右對(duì)稱地從神(shén)經管(guǎn)的背部進入，此時的脊神經(jīng)節(jié)即(jí)改(gǎi)稱(chēng)為(wéi)背根神(shén)經(jīng)節。神經(jīng)係統最基(jī)本(běn)的結(jié)構(gòu)和(hé)功能(néng)單位(wèi)是(shì)神經(jīng)元，即神(shén)經細胞(bāo)，其大(dà)小和外(wài)觀在中(zhōng)樞(shū)神經係統(tǒng)中差(chà)異很(hěn)大。但都具(jù)有胞(bāo)體(tǐ)和(hé)樹(shù)突，軸(zhóu)突。胞(bāo)體又叫核(hé)周體，內含(hán)神經絲，微管，內(nèi)質網，遊(yóu)離核(hé)糖體和一個(gè)有明(míng)顯核仁的核。一(yī)些大(dà)神(shén)經(jīng)元突起的粗麵內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可(kě)用(yòng)Nissl染(rǎn)色顯(xiǎn)示(shì)，在(zài)光鏡(jìng)下(xià)是(shì)灰藍(lán)色斑(bān)塊狀(zhuàng)，稱為(wéi)尼氏(shì)小體。樹突(tū)和軸突(tū)是神經元的(dí)突起(qǐ)，能(néng)在(zài)神(shén)經元之(zhī)間傳遞電衝動，突起(qǐ)的大小(xiǎo)和形態各不(bù)相同(tóng)，很(hěn)難(nán)用(yòng)常規的(dí)顯微鏡鑒(jiàn)別(bié)。脊髓背根(gēn)神經(jīng)節是周(zhōu)圍(wéi)神經的(dí)主要傳入神(shén)經元，是感(gǎn)覺信號傳(chuán)導(dǎo)的中繼站。背(bèi)根(gēn)神(shén)經(jīng)元(yuán)細胞的獲(huò)取較為(wéi)困(kùn)難，需要在盡可能(néng)短的時(shí)間(jiān)內通(tōng)過解剖顯(xiǎn)微鏡(jìng)獲得一(yī)定量(liáng)的(dí)背根神經(jīng)節組織。神(shén)經(jīng)組(zǔ)織體外培(péi)養方法是當代(dài)神經科學(xué)一(yī)項很(hěn)有價值(zhí)的研究手段，背根神經節(jié)富含周圍神經係統感(gǎn)覺(jué)神經(jīng)元，已(yǐ)廣(guǎng)泛用於軸(zhóu)突的(dí)導(dǎo)向及再生，中樞及周圍神經(jīng)係(xì)統的(dí)髓(suǐ)鞘(qiào)形成，神經(jīng)營養因子作用(yòng)及(jí)受體(tǐ)分布，神(shén)經細(xì)胞(bāo)衰老(lǎo)機製(zhì)，基因(yīn)治(zhì)療，組(zǔ)織工(gōng)程(chéng)等(děng)神經(jīng)科(kē)學的研究。

自(zì)備試(shì)劑： 0.25%胰蛋白(bái)酶  ， 多(duō)聚(jù)-L-賴(lài)氨酸溶(róng)液（1×）或多聚-L-賴(lài)氨(ān)酸溶液（10×）  ，PBS  ，完(wán)全(quán)培養(yǎng)基(jī)

包(bāo)被條件： PLL（0.1 mg/mL）

培養基： 大鼠背根(gēn)神(shén)經元細胞(bāo)完(wán)全(quán)培(péi)養(yǎng)基(jī)(含(hán)B-27 Supplement，Penicillin，Streptomycin等)

換液頻率(shuài)： 每2-3天換液一次(cì)

生長(cháng)特性(xìng)： 貼(tiē)壁

細胞形態(tài)： 神(shén)經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代比例： 不(bù)傳代(dài)

傳(chuán)代(dài)特(tè)性： 屬於終末(mò)分(fēn)化細胞；屬於不增殖細胞(bāo)群(qún)

消(xiāo)化(huà)液： 0.125%胰蛋(dàn)白酶

大鼠(shǔ)背(bèi)根神經元細(xì)胞(bāo)體外培(péi)養(yǎng)周期(qī)有(yǒu)限；建(jiàn)議使用(yòng)配套的(dí)專用(yòng)生長(cháng)培養基及(jí)正確(què)的操作方(fāng)法(fǎ)來培(péi)養，以(yǐ)此(cǐ)保(bǎo)證該(gāi)細胞的(dí)最(zuì)佳(jiā)培養狀(zhuàng)態。

方法簡介 實驗(yàn)室分離(lí)的大鼠(shǔ)背(bèi)根神經元細(xì)胞(bāo)采用(yòng)膠原酶-胰(yí)酶聯(lián)合(hé)消(xiāo)化法，神經元專(zhuān)用(yòng)培養基培(péi)養篩(shāi)選結合化學(xué)試(shì)劑(jì)抑(yì)製(zhì)法(fǎ)製備(bèi)而來(lái)，細胞(bāo)總量(liáng)約為5×10⁵ cells/瓶。

質量(liáng)檢(jiǎn)測 實(shí)驗(yàn)室分(fēn)離的(dí)大鼠(shǔ)背根神(shén)經元細(xì)胞經β-Tubulin-Ⅲ免(miǎn)疫熒(yíng)光(guāng)鑒定，純度可達(dá)90%以上(shàng)，且不含(hán)有HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原體，細(xì)菌，酵母和(hé)真(zhēn)菌等。