大鼠鼻黏(nián)膜(mó)成纖維細(xì)胞

大鼠鼻(bí)黏(nián)膜(mó)成纖(xiān)維(wéi)細胞分離自鼻黏膜(mó)組(zǔ)織；黏膜是(shì)覆蓋(gài)在機(jī)體(tǐ)內消化，呼(hū)吸，泌尿，生(shēng)殖等(děng)器官(guān)管(guǎn)腔內壁(bì)的(dí)一層組(zǔ)織(zhī)結(jié)構(gòu)，由上(shàng)皮組織(zhī)和(hé)疏(shū)鬆結締(dì)組(zǔ)織(zhī)構成。根據部(bù)位不同，有口(kǒu)腔黏(nián)膜，胃(wèi)腸黏膜(mó)，鼻腔(qiāng)黏膜(mó)，氣(qì)管(guǎn)黏(nián)膜，陰(yīn)道黏膜，眼(yǎn)瞼(jiǎn)黏膜等不同名(míng)稱。它(tā)們(mén)的結構也因功能，部(bù)位不一而不盡相同(tóng)。鼻(bí)腔黏(nián)膜，簡(jiǎn)稱鼻(bí)黏膜(mó)，覆蓋(gài)於鼻(bí)腔表麵，黏(nián)膜(mó)下(xià)方為軟骨(gǔ)，骨或(huò)骨骼肌。成纖(xiān)維細(xì)胞是結締(dì)組(zǔ)織的(dí)主(zhǔ)要(yào)細胞(bāo)成(chéng)分，由胚胎(tāi)時期(qī)的間充質細胞(bāo)分化而來。成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞較(jiào)大(dà)，輪(lún)廓清(qīng)楚(chǔ)，多(duō)為突起的(dí)紡錘形或星(xīng)形(xíng)的(dí)扁(biǎn)平狀(zhuàng)結構，其(qí)細胞(bāo)核呈(chéng)規(guī)則的卵圓形，核仁大(dà)而明(míng)顯。成(chéng)纖維細(xì)胞功(gōng)能(néng)活動(dòng)旺盛(shèng)，細胞質嗜弱(ruò)鹼性(xìng)，具(jù)明顯(xiǎn)的蛋白(bái)質(zhì)合(hé)成(chéng)和分(fēn)泌(mì)活(huó)動(dòng)，在一(yī)定條(tiáo)件(jiàn)下(xià)，它可(kě)以(yǐ)實現跟纖(xiān)維細胞(bāo)的互(hù)相轉化(huà)；成(chéng)纖(xiān)維細胞(bāo)對(duì)不同程度(dù)的細胞變(biàn)性(xìng)，壞(huài)死和(hé)組織(zhī)缺(quē)損(sǔn)的修(xiū)復有著(zhuó)十(shí)分重(zhòng)要(yào)的作用(yòng)。剛(gāng)分離(lí)的(dí)成纖(xiān)維細胞(bāo)呈(chéng)圓(yuán)形，折(zhē)光性(xìng)良好，懸(xuán)浮於培養基中(zhōng)。30 min細胞貼壁，其中部(bù)分開(kāi)始伸出偽足(zú)，表現為(wéi)小(xiǎo)的(dí)突(tū)起；6 h後細胞基(jī)本(běn)貼壁(bì)完全，伸展成(chéng)梭形，胞(bāo)核清晰，分(fēn)布(bù)較均匀(yún)，散在生長，不(bù)聚集成(chéng)團(tuán)；細(xì)胞(bāo)排(pái)列(liè)緊(jǐn)密(mì)，有(yǒu)的交(jiāo)叉重(zhòng)疊生(shēng)長(cháng)，平坦(tǎn)，胞(bāo)體較大(dà)，細胞質透(tòu)明(míng)，細胞(bāo)核較(jiào)大，呈(chéng)橢(tuǒ)圓形，顏色淡。細胞融(róng)合，並彼(bǐ)此(cǐ)連接成網(wǎng)狀(zhuàng)；細(xì)胞呈突(tū)起的紡(fǎng)錘形或(huò)星形的扁(biǎn)平(píng)分(fēn)布。

自(zì)備試(shì)劑(jì)： 0.25%胰蛋(dàn)白酶  ，PBS  ，完全(quán)培養基(jī)

培養(yǎng)基： 大鼠鼻(bí)黏(nián)膜(mó)成纖維(wéi)細(xì)胞完全培養基(基礎培(péi)養(yǎng)基，含FBS，bFGF，Insulin，Penicillin，Streptomycin等)

換液(yè)頻率： 每2-3天換液一次

生長特(tè)性(xìng)： 貼壁(bì)

細胞(bāo)形態(tài)： 成纖維(wéi)細胞樣(yàng)

傳(chuán)代(dài)比(bǐ)例： 1:2

傳代特性： 可(kě)傳3代左右(yòu)

消化液： 0.25%胰蛋白酶(méi)

大鼠(shǔ)鼻黏(nián)膜成(chéng)纖維細胞體(tǐ)外(wài)培養周期(qī)有限(xiàn)；建議使用配套的專(zhuān)用生長培養(yǎng)基及正確的操作(zuò)方法來培養，以此(cǐ)保(bǎo)證(zhèng)該細胞(bāo)的(dí)最佳培(péi)養狀(zhuàng)態。

方法簡介(jiè) 實驗室分(fēn)離(lí)的大(dà)鼠鼻(bí)黏膜(mó)成纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞(bāo)采(cǎi)用(yòng)胰蛋白(bái)酶(méi)-膠(jiāo)原酶(méi)混合消(xiāo)化(huà)法(fǎ)結合差速貼(tiē)壁法，並(bìng)通(tōng)過成纖維細(xì)胞(bāo)專用培養基培養篩(shāi)選製(zhì)備而(ér)來(lái)，細胞總量約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢測 實(shí)驗室分離的(dí)大(dà)鼠鼻(bí)黏膜成纖維(wéi)細胞經Vimentin免疫熒光鑒(jiàn)定，純度可(kě)達90%以上，且不含有HIV-1，HBV，HCV，支原體，細菌(jūn)，酵(jiào)母和(hé)真菌(jūn)等。