大鼠冠(guān)狀動脈(mài)內皮細胞(bāo)

大(dà)鼠冠狀(zhuàng)動(dòng)脈內(nèi)皮細胞分(fēn)離(lí)自冠(guān)狀動(dòng)脈組織(zhī)；冠狀動(dòng)脈是供給(gěi)心髒血(xiě)液(yè)的(dí)動脈，起(qǐ)於(yú)主動脈根部，分(fēn)左右兩(liǎng)支，行於(yú)心(xīn)髒表(biǎo)麵。采用(yòng)Schlesinger等(děng)的(dí)分類原則，將冠狀(zhuàng)動脈(mài)的分(fēn)布分為三型右優勢(shì)型，均衡型，左(zuǒ)優勢(shì)型。左右(yòu)冠狀動脈(mài)是升主動(dòng)脈(mài)的第一對分支(zhī)。左冠狀(zhuàng)動脈為一短(duǎn)幹，發自(zì)左(zuǒ)主動脈竇(dòu)，經肺動脈起始(shǐ)部和左心耳之(zhī)間(jiān)，沿冠狀(zhuàng)溝向(xiàng)左(zuǒ)前(qián)方行(háng)後，立即分(fēn)為前(qián)室(shì)間支和(hé)旋支。前室間支(zhī)沿前室間(jiān)溝下行，旋(xuán)支(zhī)繞過心尖切跡(jì)至(zhì)心(xīn)的膈(gé)麵(miàn)與右(yòu)冠狀動脈的(dí)後室間(jiān)支相吻(wěn)合。冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞(bāo)呈單層扁(biǎn)平(píng)分布(bù)，是一薄層(céng)的專(zhuān)門上(shàng)皮(pí)細(xì)胞，它形成冠狀動(dòng)脈的(dí)內壁，是(shì)血管管(guǎn)腔內血液及其他(tā)血(xiě)管壁(bì)（單層鱗狀上皮）的(dí)接(jiē)口(kǒu)。內皮細胞(bāo)是沿(yán)著整個循(xún)環係統(tǒng)，由(yóu)心髒直至(zhì)最小的微(wēi)血管(guǎn)。

自備試劑： 0.25%胰(yí)蛋白酶(méi)  ，多聚(jù)-L-賴(lài)氨酸(suān)溶液（1×）或(huò)多(duō)聚(jù)-L-賴(lài)氨(ān)酸(suān)溶液(yè)（10×）或(huò)明膠(jiāo)包被(bèi)液（1 mg/mL）  ，PBS  ，完(wán)全(quán)培養基

包(bāo)被(bèi)條(tiáo)件： PLL（0.1 mg/mL）或(huò)明膠（0.1%）

培養基： 大鼠冠(guān)狀(zhuàng)動(dòng)脈(mài)內皮細胞完全培養基(含FBS，生(shēng)長添加劑，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換液(yè)頻率(shuài)： 每(měi)2-3天(tiān)換液一次(cì)

生長(cháng)特性： 貼壁(bì)生(shēng)長(cháng)

細胞形態： 內(nèi)皮(pí)細胞樣(yàng)

傳代(dài)比(bǐ)例(lì)： 1:2

傳(chuán)代(dài)特(tè)性： 可傳(chuán)2-3代

消化(huà)液： 0.25%胰(yí)蛋(dàn)白酶

大(dà)鼠冠(guān)狀(zhuàng)動(dòng)脈內(nèi)皮細胞體外(wài)培養(yǎng)周(zhōu)期(qī)有限；建議(yì)使用(yòng)配(pèi)套的專(zhuān)用(yòng)生(shēng)長(cháng)培養基及正(zhèng)確(què)的操作方(fāng)法來(lái)培養(yǎng)，以(yǐ)此保證該細(xì)胞的(dí)最佳(jiā)培養狀(zhuàng)態(tài)。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分(fēn)離的大(dà)鼠冠狀動脈(mài)內(nèi)皮細(xì)胞采(cǎi)用混合酶短暫消(xiāo)化後(hòu)組織貼(tiē)塊(kuài)，結合(hé)內皮細胞專(zhuān)用培養基(jī)培養(yǎng)篩選製備而(ér)來，細胞總(zǒng)量約為5×10⁵ cells/瓶。

質量檢(jiǎn)測 實(shí)驗(yàn)室(shì)分離的(dí)大(dà)鼠(shǔ)冠狀(zhuàng)動脈(mài)內皮(pí)細(xì)胞(bāo)經(jīng)CD31免(miǎn)疫(yì)熒光(guāng)鑒(jiàn)定，純度(dù)可達90%以上，且(qiě)不含(hán)有HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體，細(xì)菌(jūn)，酵母(mǔ)和(hé)真(zhēn)菌等。