大鼠(shǔ)晶(jīng)狀(zhuàng)體(tǐ)上皮(pí)細胞

大鼠(shǔ)晶狀(zhuàng)體(tǐ)上皮細胞分離(lí)自(zì)晶(jīng)狀體組織；晶(jīng)狀體(tǐ)源自胚胎發育外胚(pēi)層，僅(jǐn)含有(yǒu)上皮(pí)細(xì)胞及(jí)其(qí)產(chǎn)物(wù)，晶狀體(tǐ)囊膜(mó)作為(wéi)屏(píng)障將晶狀體(tǐ)與其(qí)它類型(xíng)細胞(bāo)完(wán)全分(fēn)開；因而(ér)，晶狀(zhuàng)體上皮(pí)細(xì)胞培養(yǎng)既無神經和(hé)血管組(zǔ)織的幹擾，又不(bù)受其(qí)它(tā)類型細胞如成纖(xiān)維(wéi)細胞的汙染，保(bǎo)證了培(péi)養(yǎng)中細胞(bāo)成分(fēn)的單一性(xìng)。晶狀(zhuàng)體(tǐ)上(shàng)皮細(xì)胞(bāo)主(zhǔ)要(yào)負責(zé)調節晶(jīng)狀體(tǐ)的生(shēng)理平(píng)衡，包(bāo)括電解(jiě)質(zhì)和液體的輸送。在(zài)正常的發(fā)育(yù)過(guò)程中，晶狀體(tǐ)上皮細(xì)胞分(fēn)化和成(chéng)熟，然(rán)後(hòu)遷(qiān)移(yí)到(dào)晶狀(zhuàng)體(tǐ)內(nèi)部(bù)，產(chǎn)生晶(jīng)體(tǐ)蛋白(bái)，自身也(yě)拉長而變成晶狀體纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞，並最終(zhōng)失(shī)去細胞核(hé)和(hé)其它(tā)的(dí)細(xì)胞(bāo)器(qì)。研究表明，晶狀體上皮細胞(bāo)的分(fēn)化和極化受到(dào)了(liǎo)眼部液體中的生長因子的(dí)調(tiáo)控，包(bāo)括(kuò)表皮生(shēng)長(cháng)因子和胰島素等(děng)。細(xì)胞貼(tiē)壁後(hòu)為扁平不規則(zé)多(duō)角形(xíng)，呈單(dān)層生長
，連成膜(mó)狀(zhuàng)。晶狀體(tǐ)上(shàng)皮細(xì)胞(bāo)是緊密貼(tiē)附於(yú)晶狀體(tǐ)前(qián)囊內表(biǎo)麵的單層上皮(pí)細(xì)胞，其異(yì)常增殖和分(fēn)化與白內(nèi)障和(hé)後囊(náng)混濁(zhuó)的發(fā)生(shēng)密切相(xiāng)關，體外培養(yǎng)是(shì)研(yán)究其(qí)生長(cháng)規律的主(zhǔ)要手段。

自備試劑(jì)： 0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶  
，鼠(shǔ)尾膠原(yuán)蛋(dàn)白Ⅰ型(xíng)（1×）或(huò)鼠(shǔ)尾膠(jiāo)原蛋(dàn)白Ⅰ型(xíng)（1 mg/mL）  
，PBS  
，完全培養基

包(bāo)被條(tiáo)件： 鼠尾(wěi)膠(jiāo)原(yuán)Ⅰ（2-5 μg/cm²）

培(péi)養(yǎng)基： 大(dà)鼠晶狀(zhuàng)體上皮(pí)細胞完(wán)全培養基(jī)(含(hán)FBS
，生長(cháng)添加劑(jì)
，Penicillin
，Streptomycin等(děng))

換液頻(pín)率： 每(měi)2-3天(tiān)換液一次(cì)

生長特性(xìng)： 貼壁

細(xì)胞形態(tài)： 上皮細(xì)胞樣

傳代(dài)比例(lì)： 1:2

傳代(dài)特性(xìng)： 可傳(chuán)1-2代(dài)

消化液(yè)： 0.25%胰蛋(dàn)白(bái)酶

大鼠晶(jīng)狀(zhuàng)體上皮(pí)細胞體外(wài)培(péi)養周期(qī)有限；建(jiàn)議(yì)使(shǐ)用(yòng)配(pèi)套的專用(yòng)生(shēng)長培養基及(jí)正(zhèng)確(què)的操作(zuò)方法來培(péi)養(yǎng)，以(yǐ)此保證該(gāi)細胞的最佳(jiā)培養狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介 實驗(yàn)室分(fēn)離(lí)的(dí)大(dà)鼠(shǔ)晶狀體(tǐ)上皮(pí)細胞(bāo)采用(yòng)胰蛋白酶-膠(jiāo)原酶混(hùn)合消(xiāo)化法(fǎ)結合差(chà)速貼(tiē)壁(bì)法，並(bìng)通過(guò)上皮(pí)細胞(bāo)專用培養基(jī)培養(yǎng)篩(shāi)選製備而來(lái)，細(xì)胞總(zǒng)量(liáng)約為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實(shí)驗室分離的大鼠(shǔ)晶狀體上皮細(xì)胞經BFSP2（晶(jīng)狀(zhuàng)體蛋(dàn)白(bái)）免(miǎn)疫(yì)熒光(guāng)鑒定(dìng)，純(chún)度(dù)可達90%以(yǐ)上，且(qiě)不(bù)含(hán)有HIV-1
，HBV
，HCV
，支原體
，細菌
，酵(jiào)母和真(zhēn)菌等。