大(dà)鼠精原(yuán)幹細胞(bāo)

大(dà)鼠(shǔ)精(jīng)原(yuán)幹細(xì)胞(bāo)分離(lí)自睾丸(wán)組織；睾丸(wán)是雄性生殖(zhí)器(qì)官，也叫(jiào)精巢，具體結構包括生精小管(guǎn)以(yǐ)及周(zhōu)圍的結締組織(zhī)。生精小(xiǎo)管(guǎn)也叫曲精小管，曲(qū)細精管，是(shì)睾(gāo)丸上細長(cháng)而彎曲的管道。精原(yuán)幹細胞(bāo)是位(wèi)於(yú)睾丸(wán)生精(jīng)小(xiǎo)管的(dí)生(shēng)精上皮(pí)內的一群生精(jīng)幹細胞(bāo)，是成(chéng)體內(nèi)的定向幹細胞。精(jīng)原幹(gān)細胞的一些獨(dú)特(tè)優勢(shì)使其(qí)成為(wéi)動(dòng)物轉基因的理想(xiǎng)宿(sù)主(zhǔ)細(xì)胞(bāo)。精原(yuán)幹細胞的生理生(shēng)化(huà)特性及其分裂(liè)增殖，分(fēn)化等多項(xiàng)生(shēng)命活動(dòng)的(dí)調節機製(zhì)的深入研(yán)究(jiū)，精子發(fā)生(shēng)機(jī)理(lǐ)的(dí)進一步(bù)闡明以及精(jīng)原幹(gān)細(xì)胞(bāo)轉染，異(yì)體，異(yì)種(zhǒng)移(yí)植技術的實際(jì)應(yīng)用(yòng)，都(dū)迫(pò)切需(xū)要找(zhǎo)到(dào)一種可行的方法(fǎ)將(jiāng)其分(fēn)離(lí)純化，以(yǐ)期得到(dào)較(jiào)高產量(liáng)和(hé)純(chún)度(dù)的有活力的(dí)精(jīng)原細胞用(yòng)於(yú)體外培養。在哺乳動(dòng)睾丸內，精子發(fā)生(shēng)時一個(gè)受高(gāo)度調控和(hé)持(chí)續的過程(chéng)，精原(yuán)幹(gān)細(xì)胞（SSCs）一(yī)方麵進(jìn)行自(zì)我更新(xīn)維持(chí)幹細(xì)胞(bāo)數量，另(lìng)一方麵(miàn)又不(bù)斷(duàn)執(zhí)行(háng)分化成各級生精(jīng)細胞直(zhí)至最後(hòu)生成(chéng)精(jīng)子。精原(yuán)幹細胞(bāo)定居(jū)在曲精(jīng)細(xì)管上皮(pí)的(dí)基膜(mó)處，是(shì)哺乳動物(wù)精(jīng)子(zǐ)發生的最(zuì)原(yuán)始細(xì)胞(bāo)，也(yě)是(shì)動(dòng)物體(tǐ)內一起能將遺(yí)傳(chuán)信(xìn)息傳遞的幹細胞。精原(yuán)幹細胞體外培養體(tǐ)係的建(jiàn)立(lì)，在(zài)生(shēng)物(wù)學(xué)，醫(yī)學(xué)，畜牧(mù)業(yè)生產及(jí)製備(bèi)轉(zhuǎn)基因(yīn)動(dòng)物等(děng)領域具(jù)有廣(guǎng)闊(kuò)的應用前(qián)景(jǐng)。精原幹細胞(bāo)（SSCs）是(shì)生(shēng)精(jīng)上皮近基底(dǐ)膜的(dí)一群細胞，具有(yǒu)自(zì)我更(gēng)新能(néng)力(lì)和多向(xiàng)分化潛能，是哺乳動物體(tǐ)內(nèi)唯一能(néng)將(jiāng)遺傳(chuán)信息傳(chuán)遞給下一代的(dí)成體幹(gān)細胞(bāo)。

自備(bèi)試劑： 0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶(méi)  ，PBS  ，完全(quán)培(péi)養基

培(péi)養基(jī)： 大鼠(shǔ)精原幹(gān)細胞完(wán)全(quán)培養基(含FBS，生長(cháng)添加(jiā)劑，Penicillin，Streptomycin等)

換液頻(pín)率： 每(měi)2-3天換液(yè)一(yī)次(cì)

生(shēng)長特性(xìng)： 貼壁(bì)

細(xì)胞形(xíng)態(tài)： 梭形，圓形(xíng)

傳(chuán)代(dài)比(bǐ)例： 1:2

傳(chuán)代特(tè)性(xìng)： 可(kě)傳1-2代

消(xiāo)化(huà)液(yè)： 0.25%胰蛋白(bái)酶

大鼠精原(yuán)幹細(xì)胞體(tǐ)外培(péi)養周(zhōu)期(qī)有限；建(jiàn)議使(shǐ)用配套的(dí)專(zhuān)用(yòng)生(shēng)長培養基及正確的操(cāo)作方法來(lái)培(péi)養，以此(cǐ)保(bǎo)證該細胞的(dí)最佳培養(yǎng)狀(zhuàng)態(tài)。

方法簡介(jiè) 實驗(yàn)室(shì)分離(lí)的大鼠精(jīng)原(yuán)幹(gān)細胞采用先機(jī)械(xiè)吹(chuī)打(dǎ)，後胰蛋(dàn)白酶消(xiāo)化(huà)，結合(hé)Percoll密度梯(tī)度離心(xīn)法(fǎ)製備(bèi)而來，細胞總(zǒng)量約為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質(zhì)量(liáng)檢測 實驗(yàn)室(shì)分(fēn)離(lí)的(dí)大鼠(shǔ)精原幹(gān)細(xì)胞(bāo)經c-kit免疫(yì)熒(yíng)光鑒定，純度(dù)可達90%以上(shàng)，且(qiě)不含有HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原(yuán)體，細菌，酵(jiào)母和真(zhēn)菌(jūn)等(děng)。