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大鼠(shǔ)α1酸性糖蛋白ELISA試(shì)劑盒樣本處(chǔ)理(lǐ)及要(yào)求(qiú):
1. 血清(qīng):室(shì)溫(wēn)血(xiě)液自(zì)然凝固10-20分(fēn)鐘,離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔(zī)細收集(jí)上(shàng)清,保存(cún)過程(chéng)中如出(chū)現(xiàn)沉澱,應再(zài)次離心。
2. 血(xiě)漿(jiāng):應根據標本(běn)的要(yào)求(qiú)選(xuǎn)擇EDTA或檸檬(méng)酸鈉(nà)作(zuò)為(wéi)抗(kàng)凝劑,混合(hé)10-20分鐘後,離(lí)心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細(xì)收集(jí)上(shàng)清(qīng),保存過程(chéng)中如有沉澱形(xíng)成,應(yīng)該(gāi)再次(cì)離心(xīn)。
3. 尿(niào)液:用無(wú)菌(jūn)管收集,離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔細收集(jí)上清(qīng),保存過(guò)程(chéng)中如(rú)有(yǒu)沉澱(diàn)形成,應(yīng)再次(cì)離心。胸(xiōng)腹水,腦脊液參照(zhào)實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上(shàng)清:檢(jiǎn)測分泌(mì)性(xìng)的成(chéng)份時(shí),用無菌管收集。離(lí)心(xīn)20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上(shàng)清(qīng)。檢測細(xì)胞(bāo)內的(dí)成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸(xuán)液,細胞(bāo)濃(nóng)度達到
100萬(wàn)/ml左(zuǒ)右。通(tōng)過反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融,以使細(xì)胞破(pò)壞(huài)並放(fàng)出(chū)細胞(bāo)內成份。離心20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉/分(fēn))。仔細收集(jí)上(shàng)清(qīng)。保存(cún)過程中如有(yǒu)沉澱(diàn)形成,應(yīng)再次離心(xīn)。
5. 組織(zhī)標(biāo)本(běn):切割標(biāo)本(běn)後,稱取重(zhòng)量(liáng)。加(jiā)入(rù)一定(dìng)量的(dí)PBS,PH7.4。用液(yè)氮迅速冷凍保存備用。標本融化(huà)後仍然保持(chí)2-8℃的溫度(dù)。加入(rù)一定量(liáng)的PBS(PH7.4),用手工(gōng)或(huò)匀漿(jiāng)器將標本匀漿充分(fēn)。離(lí)心(xīn)20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細收(shōu)集上(shàng)清。分(fēn)裝(zhuāng)後一份待檢測(cè),其(qí)餘冷(lěng)凍(dòng)備(bèi)用(yòng)。
6. 標(biāo)本(běn)采集(jí)後(hòu)盡(jìn)早進行提(tí)取(qǔ),提取按相(xiāng)關文(wén)獻(xiàn)進(jìn)行(háng),提取(qǔ)後(hòu)應(yīng)盡(jìn)快進行(háng)實驗(yàn)。若不能馬上(shàng)進(jìn)行試驗,可將(jiāng)標本放於-20℃保存(cún),但應避免反復凍融(róng).
7. 不能檢測(cè)含(hán)NaN3的樣(yàng)品(pǐn),因NaN3抑(yì)製辣(là)根過氧(yǎng)化物酶的(HRP)活性。
1. 血清(qīng):室(shì)溫(wēn)血(xiě)液自(zì)然凝固10-20分(fēn)鐘,離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔(zī)細收集(jí)上(shàng)清,保存(cún)過程(chéng)中如出(chū)現(xiàn)沉澱,應再(zài)次離心。
2. 血(xiě)漿(jiāng):應根據標本(běn)的要(yào)求(qiú)選(xuǎn)擇EDTA或檸檬(méng)酸鈉(nà)作(zuò)為(wéi)抗(kàng)凝劑,混合(hé)10-20分鐘後,離(lí)心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細(xì)收集(jí)上(shàng)清(qīng),保存過程(chéng)中如有沉澱形(xíng)成,應(yīng)該(gāi)再次(cì)離心(xīn)。
3. 尿(niào)液:用無(wú)菌(jūn)管收集,離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔細收集(jí)上清(qīng),保存過(guò)程(chéng)中如(rú)有(yǒu)沉澱(diàn)形成,應(yīng)再次(cì)離心。胸(xiōng)腹水,腦脊液參照(zhào)實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上(shàng)清:檢(jiǎn)測分泌(mì)性(xìng)的成(chéng)份時(shí),用無菌管收集。離(lí)心(xīn)20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上(shàng)清(qīng)。檢測細(xì)胞(bāo)內的(dí)成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸(xuán)液,細胞(bāo)濃(nóng)度達到
100萬(wàn)/ml左(zuǒ)右。通(tōng)過反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融,以使細(xì)胞破(pò)壞(huài)並放(fàng)出(chū)細胞(bāo)內成份。離心20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉/分(fēn))。仔細收集(jí)上(shàng)清(qīng)。保存(cún)過程中如有(yǒu)沉澱(diàn)形成,應(yīng)再次離心(xīn)。
5. 組織(zhī)標(biāo)本(běn):切割標(biāo)本(běn)後,稱取重(zhòng)量(liáng)。加(jiā)入(rù)一定(dìng)量的(dí)PBS,PH7.4。用液(yè)氮迅速冷凍保存備用。標本融化(huà)後仍然保持(chí)2-8℃的溫度(dù)。加入(rù)一定量(liáng)的PBS(PH7.4),用手工(gōng)或(huò)匀漿(jiāng)器將標本匀漿充分(fēn)。離(lí)心(xīn)20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細收(shōu)集上(shàng)清。分(fēn)裝(zhuāng)後一份待檢測(cè),其(qí)餘冷(lěng)凍(dòng)備(bèi)用(yòng)。
6. 標(biāo)本(běn)采集(jí)後(hòu)盡(jìn)早進行提(tí)取(qǔ),提取按相(xiāng)關文(wén)獻(xiàn)進(jìn)行(háng),提取(qǔ)後(hòu)應(yīng)盡(jìn)快進行(háng)實驗(yàn)。若不能馬上(shàng)進(jìn)行試驗,可將(jiāng)標本放於-20℃保存(cún),但應避免反復凍融(róng).
7. 不能檢測(cè)含(hán)NaN3的樣(yàng)品(pǐn),因NaN3抑(yì)製辣(là)根過氧(yǎng)化物酶的(HRP)活性。
- 上(shàng)一(yī)條(tiáo):如(rú)何判(pàn)斷引(yǐn)物是否特異(yì)性結(jié)合
- 下一(yī)條:ELISA檢測(cè)小分(fēn)子為什(shí)麼用(yòng)競爭(zhēng)法
