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即用型PCR試(shì)劑盒(hé)
豬(zhū)鏈(liàn)球(qiú)菌病(bìng)(Streptococcus suis)是(shì)一(yī)種(zhǒng)人畜共患的急(jí)性,熱(rè)性(xìng)傳染病,急性
型常為出(chū)血性敗(bài)血(xiě)症和(hé)腦(nǎo)膜(mó)炎(yán),慢性型以關(guān)節(jié)炎(yán),心(xīn)內(nèi)膜炎(yán),化(huà)膿(nóng)性淋(lín)巴結炎為(wéi)特(tè)征。
豬(zhū)鏈球菌(jūn)呈圓(yuán)形或卵圓形(xíng),常呈鏈(liàn)狀排列,長(cháng)短(duǎn)不(bù)一,是(shì)革蘭氏(shì)陽(yáng)性球菌。在血平板
培(péi)養基(jī)上生(shēng)長,菌(jūn)落周(zhōu)圍形(xíng)成(chéng)溶血(xiě)環。現(xiàn)已(yǐ)發現其莢膜抗原血清(qīng)型有 35 種(zhǒng)以上(shàng)。但
是(shì),並(bìng)非所(suǒ)有的(dí)血清型都(dū)有(yǒu)致(zhì)病性(xìng)。大多(duō)數(shù)致病性血清型(xíng)在 1-9 血清型。血(xiě)清(qīng)型(xíng) 2 為(wéi)
最(zuì)常(cháng)見(jiàn)和(hé)毒力(lì)最強的(dí)血清(qīng)型。本產(chǎn)品從動(dòng)物檢(jiǎn)疫(yì)的實(shí)際出發,建(jiàn)立(lì)了 PCR 檢測方法,
用於豬鏈球(qiú)菌的(dí)快速檢測。它具有(yǒu)下(xià)列特(tè)點:
1. 即(jí)開(kāi)即用,用戶隻(zhī)需要(yào)提供樣品(pǐn) DNA 模板(bǎn),操作簡單,定(dìng)量準確快(kuài)速。
2. 引(yǐn)物經過(guò)優化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(cháng)度(dù)為 560 bp。
3. PCR mix 中(zhōng)含(hán)上樣染料,PCR 後(hòu)可(kě)以直(zhí)接上樣電泳(yǒng)。
4. 提供陽性對(duì)照(zhào),便於(yú)分(fēn)析(xī)試(shì)驗結果。
運輸(shū)及(jí)保存:
低溫運輸,-20℃保存,保(bǎo)存(cún)期限(xiàn)一年(nián)。
使用方法:
一(yī),樣(yàng)品 DNA 的(dí)製備(bèi)
用(yòng)自選方法(fǎ)提取(qǔ)豬(zhū)鏈球(qiú)菌(jūn) DNA。
二,陽性對照
1. 為增加(jiā)產品穩(wěn)定(dìng)性和避免擴散傳染(rǎn)性病原,本產品不提(tí)供活(huó)體菌(jūn)做陽(yáng)性對照,隻(zhī)
提供沒有傳染性(xìng)的(dí),可以(yǐ)直接使用(yòng)的 DNA 片(piàn)段作(zuò)為陽性(xìng)對照。
2. 使用本(běn)陽(yáng)性(xìng)對照時,由於(yú)其濃度較(jiào)高(gāo),一定(dìng)要(yào)注意不(bù)要(yào)汙染其他試(shì)劑(jì)和(hé)成分(fēn)。最
好在專門的區域(yù)操(cāo)作(zuò)。
三(sān),設置 PCR 反應(yīng)(25 uL 體係)
3. 在 PCR 管中加入下列成(chéng)分(fēn):
成 份 樣品 陽(yáng)性對(duì)照 陰(yīn)性(xìng)對(duì)照
S.s 專(zhuān)一性引物(wù)一(yī) 2 uL 2 uL 2 uL
樣品(pǐn) DNA 1-5 uL 無 無
S.s 陽性(xìng)對照(zhào) 無(wú) 2 uL 無
補超純水到(dào) 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用(yòng)型(xíng) PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 輕柔(róu)混(hùn)匀(yún)後上機,按(àn)下麵參數進行(háng) PCR。
過(guò)程(chéng) 溫度 時(shí)間
預變性(xìng) 95℃ 3 min
PCR 反(fǎn)應
(30 個循(xún)環(huán))
95℃ 30 s
50℃ 30 s
72℃ 40 s
延伸 72℃ 10 min
5. 電(diàn)泳檢測 PCR 產(chǎn)物。預期的 PCR 產物(wù)長(cháng)度為(wéi) 560 bp。
