技(jì)術文(wén)獻
技術(shù)文獻(xiàn)
人(rén)雙調(tiáo)蛋(dàn)白(AREG)ELISA試(shì)劑(jì)盒樣本處(chǔ)理(lǐ)及要求
人雙(shuāng)調蛋(dàn)白(AREG)ELISA試劑(jì)盒樣(yàng)本處理(lǐ)及要求(qiú):
1. 血清(qīng):室溫血(xiě)液(yè)自然凝固10-20分(fēn)鐘,離心(xīn)20分(fēn)鐘左(zuǒ)右(2000-3000轉/分)。仔細收(shōu)集上(shàng)清,保(bǎo)存過(guò)程中如(rú)出(chū)現(xiàn)沉(chén)澱,應再(zài)次離心。
2. 血漿(jiāng):應根(gēn)據標(biāo)本的要求選擇(zé)EDTA或檸檬(méng)酸鈉作為(wéi)抗凝劑,混合10-20分鐘後(hòu),離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右(2000-3000轉/分)。仔(zī)細(xì)收集上(shàng)清,保存(cún)過程中如有(yǒu)沉(chén)澱形成,應該再次離心(xīn)。
3. 尿液:用(yòng)無菌管(guǎn)收(shōu)集,離(lí)心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上(shàng)清,保存過(guò)程(chéng)中如有(yǒu)沉澱形(xíng)成(chéng),應(yīng)再次(cì)離(lí)心。胸腹(fù)水,腦脊液(yè)參照實行(háng)。
4. 細胞培(péi)養(yǎng)上清(qīng):檢測分泌(mì)性的(dí)成(chéng)份時,用(yòng)無(wú)菌管(guǎn)收集(jí)。離(lí)心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右(2000-3000轉/分(fēn))。仔(zī)細(xì)收(shōu)集(jí)上清。檢(jiǎn)測細胞內的成(chéng)份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞(bāo)懸(xuán)液(yè),細(xì)胞(bāo)濃度(dù)達(dá)到100萬(wàn)/ml左(zuǒ)右。通(tōng)過反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng),以使(shǐ)細胞破壞並(bìng)放出(chū)細胞內成(chéng)份(fèn)。離心(xīn)20分(fēn)鐘左(zuǒ)右(2000-3000轉/分(fēn))。仔細(xì)收集上(shàng)清。保存(cún)過程中如有(yǒu)沉(chén)澱(diàn)形成(chéng),應再(zài)次(cì)離心(xīn)。
5. 組織(zhī)標本:切割標(biāo)本後,稱取重(zhòng)量。加入一(yī)定(dìng)量的PBS,PH7.4。用液氮迅速(sù)冷(lěng)凍保存備用。標(biāo)本融化(huà)後仍然保持(chí)2-8℃的(dí)溫(wēn)度。加入(rù)一定(dìng)量的PBS(PH7.4),用手(shǒu)工或匀漿(jiāng)器將標本匀(yún)漿(jiāng)充分。離心(xīn)20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔細(xì)收(shōu)集上(shàng)清。分(fēn)裝後一份待檢測,其餘冷凍(dòng)備用(yòng)。
6. 標(biāo)本(běn)采(cǎi)集(jí)後盡早進(jìn)行(háng)提(tí)取(qǔ),提取按相關(guān)文(wén)獻(xiàn)進(jìn)行,提取後應(yīng)盡(jìn)快進(jìn)行實驗(yàn)。若(ruò)不能馬上進行試驗,可(kě)將標本(běn)放(fàng)於-20℃保存,但應(yīng)避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng).
7. 不能(néng)檢測(cè)含NaN3的(dí)樣(yàng)品,因(yīn)NaN3抑(yì)製(zhì)辣根過氧化(huà)物酶的(dí)(HRP)活(huó)性。
- 上(shàng)一(yī)條:棉(mián)藍(lán)乳酚油染(rǎn)色液使用(yòng)方法
- 下一(yī)條:免疫熒光染(rǎn)色步驟(zhòu)有(yǒu)哪些
