技術文獻
技術文獻
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*,第二孔中分別加標準品100μl,然後在*,第二孔中加標準品稀釋液50μl,混匀;然後從*孔,第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三,第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混匀;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五,第六孔中,再在第五,第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混匀;混匀後從第五,第六孔中各取50μl分別加到第七,第八孔中,再在第七,第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混匀後從第七,第八孔中分別取50μl加到第九,第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混匀後從第九第十孔中各取50μl棄掉。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘各步操作相同),待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加於酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混匀。
3. 溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋後備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重復5次,拍幹。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混匀,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
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