都說是(shì)封(fēng)閉(bì)，羊血(xiě)清究竟(jìng)封閉的是(shì)什(shí)麼(mó)（抗原(yuán)？）那(nà)接(jiē)下來(lái)加一抗(kàng)怎麼又能反應(yīng)結(jié)合？不(bù)是封(fēng)閉了嗎？

      封閉(bì)的目(mù)的是(shì)為(wéi)了減(jiǎn)少非(fēi)特異染色。

      這(zhè)裏(lǐ)，允許小(xiǎo)編介紹下免疫組(zǔ)化(huà)中封閉(bì)血清的原(yuán)理，封閉(bì)血清(qīng)的原理(lǐ)主要(yào)有兩點(diǎn)：

       第(dì)一是待檢樣(yàng)本會非特異性的和蛋白(bái)結合(hé)，從(cóng)而導致背(bèi)景過高(gāo)，因(yīn)此(cǐ)可以用(yòng)BSA或血清(qīng)封閉掉這(zhè)部(bù)分(fēn)非(fēi)特異(yì)性的(dí)結合(hé)，從(cóng)這點(diǎn)看(kàn)，BSA和血清(qīng)沒(méi)有明顯區(qū)別(bié)。

      第二是待檢(jiǎn)樣本(běn)中可能會(huì)有Fc受(shòu)體，可以和抗(kàng)體恒定(dìng)區(qū)結合(hé)，與(yǔ)抗(kàng)體特異性(xìng)無關(guān)，封閉血清(qīng)中(zhōng)有抗體，因此用血清(qīng)可以(yǐ)封(fēng)閉掉一(yī)抗及二(èr)抗和(hé)樣(yàng)本(běn)Fc受體(tǐ)之間結(jié)合。BSA則無法封(fēng)閉Fc受體。

      免(miǎn)疫組(zǔ)化中(zhōng)用血(xiě)清(qīng)封閉(bì)的(dí)較多。封閉血(xiě)清一(yī)般選(xuǎn)擇(zé)和二抗同一來(lái)源的（如一抗為兔來源(yuán)多抗，二抗為山羊抗兔(tù)IgG，那(nà)封閉液就用山(shān)羊(yáng)血(xiě)清），血清(qīng)中動(dòng)物自(zì)身的抗體(tǐ)，預先(xiān)能(néng)和組織中有交(jiāo)叉反應(yīng)的(dí)位(wèi)點發生(shēng)結(jié)合，否(fǒu)則在(zài)後麵的步驟(zhòu)中(zhōng)如(rú)果(guǒ)和二抗發(fā)生結(jié)合(hé)，會造(zào)成背景。但要(yào)注意封(fēng)閉(bì)用血清(qīng)中(zhōng)不(bù)能(néng)含有目標蛋(dàn)白(bái)，且與(yǔ)一(yī)抗(kàng)來源(yuán)不同。另外(wài)二(èr)抗因盡量少選取兔子(zǐ)或老鼠(shǔ)來源的，因為(wéi)這兩個在親緣關係上和人(rén)類非常接近，所以(yǐ)產(chǎn)生(shēng)交叉(chā)反(fǎn)應的(dí)機會就比(bǐ)較(jiào)大，從(cóng)而導致背景(jǐng)比(bǐ)較高(gāo)。!適(shì)合(hé)選用來(lái)源(yuán)於(yú)驢(lǘ)，山(shān)羊(yáng)，綿羊等的(dí)二(èr)抗(kàng)，背景相(xiāng)對就(jiù)很(hěn)低。

      所以二抗(kàng)來源的動物血(xiě)清(qīng)封閉(bì)的(dí)是(shì)組織上帶電荷(hé)基團(tuán)。因(yīn)為(wéi)組(zǔ)織(zhī)中非抗原(yuán)抗體反應出(chū)現的(dí)非特異性背(bèi)景(jǐng)染(rǎn)色(sè)，最常(cháng)見的(dí)原(yuán)因(yīn)是蛋白吸附於高電(diàn)荷的膠元和結(jié)締組織成分上(shàng)。這並不影(yǐng)響(xiǎng)接下來一(yī)抗的結(jié)合(hé)，因為(wéi)這(zhè)種結合(hé)是(shì)特(tè)異的，親(qīn)和力(lì)遠遠高(gāo)於(yú)因電荷(hé)作用(yòng)的結合(hé)，因(yīn)此會(huì)競爭勝出。