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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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鮑(bào)氏不動杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Acinetobacter baumanniiPCR |
YS-P013774 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度下。核(hé)酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於可疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為陽性，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與保(bǎo)守性。
鮑(bào)氏(shì)不(bù)動杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對原則的。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位)；在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產物一般用電泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求低
不(bù)需(xū)要分離病毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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