產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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魯氏(shì)不動杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
Acinetobacter lwoffiPCR |
YS-P013775 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一般為1年(nián)，這是指在適當的儲存溫度下。核酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣本；對於可疑樣本(běn)建議復核(hé)一次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判定為陽性，否則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存不當(dāng)或(huò)試劑配製不準確(què)引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
魯氏不動(dòng)杆菌PCR檢測試劑盒其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合(hé)的特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基因片(piàn)段也就能保持很高(gāo)的正確度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量是以(yǐ)指數方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應液加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要(yào)求低
不需要分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴增模板。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
