產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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胸膜(mó)肺(fèi)炎放綫杆菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Actinobacillus pleuropneumoniaePCR |
YS-P013779 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指在適(shì)當的(dí)儲存溫度下。核酸擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好超過正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該次實驗視為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本；對於可疑樣本建議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判定為陽(yáng)性，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當或(huò)試(shì)劑配製不準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能會導致出現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
胸膜(mó)肺(fèi)炎放綫(xiàn)杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進行，結合的(dí)特(tè)異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因區，其特(tè)異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般在(zài)2～4 小時完成擴增反應。擴(kuò)增產物一(yī)般用電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接(jiē)用臨床標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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