產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
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馬杜(dù)拉放綫菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Actinomadura maduraePCR |
YS-P013780 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有效期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般(bān)為1年，這是指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴增部分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結果應為陽性，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣本建議復核(hé)一次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判定(dìng)為陽性，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運輸，保存不當(dāng)或(huò)試劑配製(zhì)不準確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性；
④靶基因的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
馬杜拉放綫(xiàn)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性，使反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學中zui小檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般用電泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同位(wèi)素，無放(fàng)射性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血(xiě)液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術概論。
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