產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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內氏放(fàng)綫菌PCR檢測試(shì)劑盒 |
Actinomyces naeslundiiPCR |
YS-P013785 |
分類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的(dí)指數擴增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不當或(huò)試劑(jì)配製不準確引起的試劑檢測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能會導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
內(nèi)氏放(fàng)綫菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引物與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關(guān)鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈的延伸是遵循鹼基配對原則的(dí)。聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的靶基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保守性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū)，其(qí)特異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要求低
不需要分離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用臨床(chuáng)標本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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