產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
|
雞貧血病毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Chicken Anemia Virus（CAV）PCR |
YS-P014003 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免反復凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結(jié)果分析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超過正常陰(yīn)性質控品擴增曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則該次實(shí)驗視為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於可疑樣本建議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙(wū)染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配製不準確(què)引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
雞貧(pín)血(xiě)病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結(jié)合及引物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使反應中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行，結合的特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因片段也就(jiù)能保持很高的正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是以指數方式(shì)增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細胞中檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析，不一定(dìng)要用同(tóng)位素，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度(dù)要求低
不(bù)需要分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
