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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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獸類(lèi)嗜衣(yī)原體PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Chlamydophila pecorumPCR |
YS-P014011 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這(zhè)是指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增部分的(dí)試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一次實驗中同時滿足，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議復核一次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確引起的(dí)試劑檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導致出現假陰性結果。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
獸類(lèi)嗜衣原體PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵。引物與模板的結合及(jí)引物鏈的延伸是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增加，被(bèi)擴增的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一(yī)定要用同位素，無放射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需要分離病(bìng)毒或細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
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