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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒

貓嗜衣原體PCR檢測試劑盒

文(wén)字(zì):[大(dà)][中][小] 2024-3-14    瀏覽次數:702    
商品屬(shǔ)性
產品名(míng)稱(chēng) 英文名稱(chēng) 貨號(hào)
貓嗜衣原(yuán)體PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
Chlamydophila felisPCR
YS-P014010
規格:50T
分(fēn)類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸:低溫(wēn),避(bì)光。
有效(xiào)期:一年(nián)

貨(huò)期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期一般為1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫度下。核酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下,產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。

【結果分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 基綫(Baseline)設定(dìng):應選擇該(gāi)次(cì)實驗指數(shù)擴(kuò)增(zēng)前所有(yǒu)樣本熒光信(xìn)號(hào)比較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所有(yǒu)樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避(bì)開(kāi)熒光(guāng)采集(jí)起(qǐ)始階段(duàn)的信號波(bō)動,終(zhōng)止(zhǐ)點(End)應比(bǐ)最早(zǎo)出現(xiàn)指數擴(kuò)增(zēng)的(dí)樣本Ct值減(jiǎn)少1~3個(gè)循環,建(jiàn)議(yì)基綫(xiàn)設為6~15。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最高點。
【質控(kòng)標準】
1.   陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為陰性,無指數擴增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct;
2.   陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性,有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35;
3.   以上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足,否則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
1.   陽性:有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且Ct<38;
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本為可(kě)疑樣本(běn);對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一(yī)次,若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,則判(pàn)定為(wéi)陽性,否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性;
3.   陰(yīn)性:無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1.   實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染,試(shì)劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果(guǒ);

2.   試劑運輸(shū),保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng),可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。

PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng):
   ①引物與(yǔ)模(mó)板DNA特(tè)異(yì)正確的(dí)結(jié)合(hé);
   ②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé);
   ③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性(xìng);
   ④靶基(jī)因(yīn)的特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
貓(māo)嗜(shì)衣原(yuán)體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng),使(shǐ)反應中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復性)可(kě)以在較高的溫度下進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大增(zēng)加,被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶基因區,其(qí)特異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式(shì)增加的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細胞中(zhōng)檢出一個靶細胞;在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi));在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一次性地(dì)將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後,即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用電泳(yǒng)分析,不一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位素,無(wú)放射性(xìng)汙染,易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分離病毒或細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液,體腔液(yè),洗嗽液,毛(máo)發,細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術概論。
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