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產品中心
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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豬瘟病(bìng)毒野生株PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Classical Swine Fever VirusWT(CSFVWT)RTPCR |
YS-P014025 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性，否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存不當或試劑配製不準確(què)引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降，可能(néng)會導致出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
豬瘟(wēn)病(bìng)毒野生(shēng)株PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結(jié)合及引物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很高的正確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地(dì)將反應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴增(zēng)模板。可直接用臨(lín)床標本如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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