產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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中華枝(zhī)睾(gāo)吸(xī)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
Clonorchis sinensisPCR |
YS-P014026 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽性，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與(yǔ)保守性(xìng)。
中華(huá)枝(zhī)睾吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應中模板與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異性大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能(néng)保持(chí)很高的正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異(yì)性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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