產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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肉(ròu)毒(dú)梭狀(zhuàng)芽孢(bāo)杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Clostridium botulinumPCR |
YS-P014027 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般為1年，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常陰性質控品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽性，有明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一(yī)次實驗中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則判定為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配製不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基因的(dí)特異性與保守性。
肉毒(dú)梭狀芽孢杆菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物與模(mó)板的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合的特異性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性高的(dí)靶基因區，其特(tè)異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成量是(shì)以指數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地將反應液加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分析，不一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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