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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性
| 產品名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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氣(qì)腫疽(jū)梭狀(zhuàng)芽(yá)孢(bāo)杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Clostridium chauvoeiPCR |
YS-P014028 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是指在適當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在剛(gāng)好超過正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核一次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙染會出(chū)現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑配製不準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下降，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異性與(yǔ)保守性(xìng)。
氣腫疽梭狀芽孢杆菌PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及引物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能保持(chí)很高的正(zhèng)確度。再(zài)通過選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方式(shì)增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴增反應。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分離病毒或細菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板。可直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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