產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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牛(niú)棒(bàng)杆菌PCR檢測試劑盒(hé) |
Corynebacterium bovisPCR |
YS-P014054 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫，避(bì)光。
有效期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年，這是指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於可疑樣本(běn)建議復(fù)核一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng)，否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出現假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異性與保守性。
牛(niú)棒(bàng)杆菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反應(yīng)中模(mó)板與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性和保(bǎo)守性高(gāo)的靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方式增加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要(yào)求低
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
