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產品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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白喉棒杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Corynebacterium diphtheriaePCR |
YS-P014055 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍融(róng)。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年，這是指在適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核(hé)酸擴增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於可疑(yí)樣本建議(yì)復核(hé)一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
白(bái)喉棒(bàng)杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與模板的正確(què)結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的溫度(dù)下(xià)進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保守性高的靶基因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位)；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
