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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
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極小(xiǎo)棒杆菌PCR檢測試劑盒(hé) |
Corynebacterium minutissimumPCR |
YS-P014056 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴增部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實驗中同時滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本；對於(yú)可(kě)疑樣本建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰性：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存不(bù)當或試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能(néng)會導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性與保守(shǒu)性。
極小棒(bàng)杆菌(jūn)PCR檢測試劑盒其中引(yǐn)物與模(mó)板的正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對原則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進行，結合的特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是以(yǐ)指數方(fāng)式增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反應液加好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電泳分析，不一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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