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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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貝氏(shì)隱孢子蟲PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Cryptosporidium baileyiPCR |
YS-P014071 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑一般要貯存於-20℃下，產物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次(cì)實(shí)驗中同時滿足，否則該次實驗視(shì)為無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定為(wéi)陽性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能下(xià)降，可能會導致出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
貝氏隱(yǐn)孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵。引物與模板(bǎn)的結合及引物鏈的(dí)延(yán)伸是遵循(xún)鹼基配對原則的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異性大大(dà)增加，被擴增的靶基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守性高的靶基因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定要用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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