產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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登革(gé)病毒(dú)型PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Dengue Virus(DENV)4RTPCR |
YS-P014088 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的試劑(jì)一般要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本(běn)；對於可疑樣本建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
登(dēng)革病(bìng)毒型PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其(qí)中引物與模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫度下(xià)進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其特異性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生成量是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在細菌學中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定要用同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要求低
不需要分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模板。可直接用臨床標本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
