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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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槍狀肝(gān)吸(xī)蟲(chóng)PCR檢測試劑盒 |
Dicrocoelium dentriticumPCR |
YS-P014095 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這是指在適當的儲存(cún)溫度下。核酸擴增部分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫的最高點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以上(shàng)要求需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本；對於可疑樣本建議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製不準確(què)引起的試(shì)劑檢測效能下降，可能(néng)會導致出現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
槍狀(zhuàng)肝(gān)吸蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引物與模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以指數方式增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產物一(yī)般(bān)用電泳分析(xī)，不一(yī)定要用同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不需要分離(lí)病毒或(huò)細菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
