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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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似(sì)血(xiě)矛(máo)綫蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Haemonchus similisPCR |
YS-P014250 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實驗中同時滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次，若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或試劑配製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
似血矛綫蟲PCR檢測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶基因片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增加的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要(yào)求低
不需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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