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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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埃可(kě)病(bìng)毒(dú)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
ECHO VirusRTPCR |
YS-P014113 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的有效期一(yī)般為1年，這是指在(zài)適當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結果應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng)，可能會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
埃可病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再(zài)通過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數方(fāng)式增加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產物一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離病毒或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本如血液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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