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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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鮰(huí)愛德華氏菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Edwardsiella ictaluriPCR |
YS-P014114 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，則判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
鮰(huí)愛(ài)德(dé)華氏菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配對原則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應中模(mó)板與引(yǐn)物的結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進行，結(jié)合(hé)的特異性大大增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是以指數方式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地將反應液(yè)加好後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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