產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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大(dà)片(piàn)吸(xī)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Fasciola giganticaPCR |
YS-P014186 |
分類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一(yī)次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該次實驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對於可疑樣本建(jiàn)議復核一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製不準確(què)引起的試劑檢測效(xiào)能(néng)下降，可能會(huì)導致出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性。
大(dà)片(piàn)吸(xī)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確結(jié)合是關鍵。引物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異性和保守性高的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測模板擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性(xìng)地將反應液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應。擴增產物一般(bān)用電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對標本(běn)的純度要求低
不(bù)需要分離病毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
