產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
沙門氏(shì)菌invA 基(jī)因(yīn)熒(yíng)光(guāng)PCR檢測試劑盒(探針法)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號 |
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沙門氏菌invA 基(jī)因熒光(guāng)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(探針(zhēn)法(fǎ)) |
50T |
YS-P015238 |
儲存條件(jiàn):-20℃避光保(bǎo)存,避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū):低溫(wēn),避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期:一(yī)年
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年,這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫度(dù)下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下,產物檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的最高(gāo)點。
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增期(qī),Ct值應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足,否(fǒu)則該次實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
2.可疑:有明顯的指數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣本(běn);對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次,若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判定為(wéi)陰性;
3. 陰性(xìng):無指數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn),試(shì)劑汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確(què)引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降(jiàng),可(kě)能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。

②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實性;
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
沙(shā)門(mén)氏菌invA 基(jī)因熒(yíng)光PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(探針法(fǎ))其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合(hé)及引物鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性,使(shǐ)反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng),結合的(dí)特異(yì)性大大(dà)增加(jiā),被擴增(zēng)的(dí)靶基因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區,其特(tè)異性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的,能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞;在病(bìng)毒的(dí)檢測中,PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位(wèi));在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn),快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋上進行(háng)變性-退火-延伸反(fǎn)應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般(bān)用電泳分(fēn)析,不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無放射性(xìng)汙染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模板。可直接用臨床標本如血液,體腔液,洗嗽液,毛發,細胞,活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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