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產品中心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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費(fèi)蘭(lán)杜病毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
Flanders VirusRTPCR |
YS-P014194 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年，這(zhè)是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測部分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣本建議(yì)復核一(yī)次(cì)，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不準確引起的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
費(fèi)蘭(lán)杜病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度下進(jìn)行，結合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段也(yě)就能保持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以指數方式(shì)增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反應(yīng)液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用電泳分析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要求低
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
