產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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蜂房(fáng)蜜蜂球(qiú)菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Melissococcus plutoniusPCR |
YS-P014411 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度下。核酸擴增部分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以上要求(qiú)需在一次(cì)實驗中同時(shí)滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可疑樣本；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次，若復(fù)核結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假陰(yīn)性結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
蜂(fēng)房(fáng)蜜(mì)蜂(fēng)球(qiú)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(復性)可(kě)以在較高的溫度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因區，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以指數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用同位素(sù)，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
