產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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雞痘病毒PCR檢測試劑盒 |
Fowlpox Virus(FPV)PCR |
YS-P014209 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條件:-20℃避(bì)光保存(cún),避免反復凍融。
運輸(shū):低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效期:一(yī)年
貨期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年(nián),這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產物檢測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性,有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期,Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同時滿足,否(fǒu)則(zé)該次實驗視為無效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一次,若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期,則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染,試劑汙染,樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出現假陽性結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸,保存不當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降,可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現假陰性結(jié)果。
②鹼基(jī)配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性;
④靶基(jī)因的(dí)特異性與保守性(xìng)。
雞(jī)痘病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合及引物鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則的。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性(xìng),使反應中模板與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng),結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加,被擴增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高的(dí)靶基因區,其(qí)特異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加的,能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞;在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位);在(zài)細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後,即在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一(yī)般在2~4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一般用電泳(yǒng)分析(xī),不一定要用同(tóng)位素,無放射(shè)性汙染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需要分離病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液,體(tǐ)腔液,洗嗽液,毛發(fā),細(xì)胞(bāo),活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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