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PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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禽(qín)杯狀(zhuàng)病毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Fowl CalicivirusRTPCR |
YS-P014208 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次，若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下(xià)降，可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基因的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
禽杯(bēi)狀(zhuàng)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確結合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的結合(hé)及引物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使反應(yīng)中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫度下(xià)進行(háng)，結合的特(tè)異性大大增加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就能保持很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶基因(yīn)區，其特(tè)異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般用電泳分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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