產品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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梨孢鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
Fusarium poaePCR |
YS-P014218 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保存，避免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣本建議(yì)復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性結果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性與保守性。
梨孢(bāo)鐮刀菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結(jié)合及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應中模板與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴增的(dí)靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其(qí)特異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是以指數方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無放射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要(yào)求低
不(bù)需要分離病(bìng)毒或細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨床標本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論。
