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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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傑米斯(sī)頓(dùn)病毒PCR檢測試劑盒 |
Germiston VirusRTPCR |
YS-P014230 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的有效期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是指在適(shì)當的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質控品擴增曲綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與保(bǎo)守性。
傑(jié)米(mǐ)斯頓(dùn)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高的靶基(jī)因區，其特(tè)異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi))；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地將反應液加好後，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒或細菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板。可直接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
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