產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨號 |
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豬肺炎支原體PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015335 |
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián)，這(zhè)是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該次實驗視為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑檢測效能(néng)下降，可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異性與保(bǎo)守性(xìng)。
豬肺炎(yán)支原(yuán)體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的(dí)結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特異性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基(jī)因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生成量是以指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反應。擴增(zēng)產物一般用電泳分析，不一(yī)定(dìng)要用同位素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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