產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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草(cǎo)魚呼(hū)腸(cháng)孤病毒(dú)型PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Grass Carp Reovirus(GCRV)3RTPCR |
YS-P014240 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部分(fēn)試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能下降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶基因的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
草魚呼腸孤病毒(dú)型PCR檢測(cè)試劑盒其中引物(wù)與模板(bǎn)的正確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的溫度(dù)下進行，結合的(dí)特異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基因片段也就(jiù)能保持很(hěn)高的(dí)正確度。再(zài)通過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性高的靶基因區，其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析，不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素，無放射(shè)性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分離病毒或(huò)細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
