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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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癢(yǎng)蟎(mǎn)通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Psoroptes spp. PCR |
YS-P014654 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
儲存(cún)條件:-20℃避光保(bǎo)存,避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸:低(dī)溫(wēn),避光。
有效(xiào)期:一(yī)年
貨期:現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年,這是(shì)指在適當的儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超過正常陰性質控品擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足,否則(zé)該次實(shí)驗視為(wéi)無效。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本;對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次,若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則判定為陰(yīn)性;
3. 陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染,試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果;
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能下降,可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性;
④靶基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守性。
癢蟎(mǎn)通用PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性,使反應中模(mó)板與引物(wù)的結合(復(fù)性)可以在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行,結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā),被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的正確度。再(zài)通過選擇特異性和保守性高(gāo)的靶基因(yīn)區,其特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單位);在(zài)細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶,一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加好後(hòu),即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng),一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳分析,不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù),無放射(shè)性(xìng)汙染,易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求低
不需要(yào)分離病毒或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模板。可(kě)直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液,毛發,細胞(bāo),活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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