產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
人類(lèi)嗜(shì)淋巴(bā)細(xì)胞(bāo)病毒(dú)前(qián)病毒通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
| 產品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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人(rén)類嗜(shì)淋(lín)巴(bā)細胞(bāo)病毒前病毒通用(yòng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Human Tcell Lymphoma Virus Provirus (HTLV)TPCR |
YS-P014317 |
分(fēn)類:PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件:-20℃避光保存(cún),避免反復(fù)凍融。
運輸:低(dī)溫,避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年,這是指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下,產(chǎn)物檢測部分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應為(wéi)陽性(xìng),有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35;
3. 以上(shàng)要求需在一次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足,否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視為無效(xiào)。
2.可疑:有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn);對於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議復核(hé)一次(cì),若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則判定為(wéi)陽性,否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染,試(shì)劑汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果;
2. 試劑運輸(shū),保存不當或試劑配(pèi)製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降(jiàng),可能會導(dǎo)致出現假陰性結(jié)果(guǒ)。
②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
人類嗜淋巴(bā)細(xì)胞(bāo)病毒前(qián)病毒(dú)通用PCR檢測試(shì)劑盒其中引物與(yǔ)模板的正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性,使反應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng),結(jié)合(hé)的(dí)特異性大(dà)大增加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區,其特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細胞(bāo);在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位);在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液加(jiā)好後(hòu),即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應,一(yī)般在2~4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般用電泳分(fēn)析,不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位素,無放(fàng)射性汙染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗製品及總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液(yè),體腔液(yè),洗嗽液(yè),毛發(fā),細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概論。
