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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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巨細胞病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Cytomegalovirus(CMV)PCR |
YS-P014084 |
分(fēn)類:PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條件:-20℃避光(guāng)保存,避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū):低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有效期:一年(nián)
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般為1年(nián),這是指在適當的儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期,Ct值應小於等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則該次實(shí)驗視為無(wú)效。
2.可(kě)疑(yí):有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為可(kě)疑樣本;對於可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一(yī)次,若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期,則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性,否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性;
3. 陰性:無指數擴(kuò)增期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染,試劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出現假陽性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑運輸(shū),保存不(bù)當(dāng)或試劑配製不準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng),可能會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
②鹼基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性;
④靶基因(yīn)的特異(yì)性與保守(shǒu)性。
巨細胞(bāo)病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板的(dí)正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延伸是遵循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性,使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下(xià)進(jìn)行,結合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加(jiā),被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很高的正確度。再通過選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區(qū),其特異(yì)性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是以指數方式(shì)增加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞;在病毒的(dí)檢測中(zhōng),PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi));在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後,即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用電泳分析(xī),不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素,無放射(shè)性(xìng)汙染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求(qiú)低
不需要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標本如血液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽液,毛發(fā),細胞,活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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